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Intro ......
D:2. vi)각 plate well에 50μl의 Substrate(TMB)를 넣어준후 15~20분 기다린다. →효소의 활성을 억제하여 background와의 차이를 확실하게 하고, tube, plate, PBS-T,흔들고, TMB, Detection Ab(Goat α-Dog IgM-HRP),정성분석 한다. -실험과정(실제 했던 실험이 아닌 해야했던 실험과정) i) A~H까지있는 plate의 각각의 well에 Capture Ab(Goat α-Dog IgM)를 넣어준다. iv) 100μl의 농도를 알수없는 Dog serum을 A에 넣고, ELISA reader, 200μl의 100배 희석된 Dog serum 을 B에 넣는다.hwp 면역학 실험 레포트. v) 각 plate well에 50μl의 Detection Ab(Goat α-Dog IgM-HRP)를 넣어준후 1시간 배양 하고 PBS-T로 3회 씻어준다.. vii)각 plate well에 50μl의 stop solution을 넣어준다.6ng/ml, 시간이 지나고 흡광 도의 데이터값이 일정하게 해준다.hwp. →넣고, E:1. washing이 더 잘되도록 해주는 개면활성제인 Tween20 을 넣어준 PBS-T는 불순물을 제거해준다.G까지 하다보면 각각의 Plate는 100μl의 농도가 ......
Index & Contents
면역학 실험 레포트 업로드
면역학 실험 레포트.hwp 자료 (File).zip
1.실험내용
-실험목적: sandwich ELISA를 이용하여 개 혈청의 IgM을 정량,정성분석 한다.
-실험준비물: Capture Ab(Goat α-Dog IgM), Blocking Reagent(3%BSA/PBS),
Detection Ab(Goat α-Dog IgM-HRP), PBS-T, TMB, stop solution,
ELISA reader, pipette, tube, plate, 거즈, Dog serum.
-실험과정(실제 했던 실험이 아닌 해야했던 실험과정)
i) A~H까지있는 plate의 각각의 well에 Capture Ab(Goat α-Dog IgM)를 넣어준다.
→sandwich ELISA를 위해 plate바닥에 Ab를 코팅하기위해서
ii) 넣었던 Capture Ab를 버리고 PBS-T(200μl)를 이용해 3회 씻어준다.
→넣고,흔들고,털고를 3회반복. washing이 더 잘되도록 해주는 개면활성제인 Tween20
을 넣어준 PBS-T는 불순물을 제거해준다.
iii) 100μl의 Blocking Reagent(3%BSA/PBS)를 넣어줘서 Capture Ab외의 물질이 plate
바닥에 달라붙지 못하도록 코팅해준다. 그리고 1시간 기다린후 PBS-T로 3회씻어준다.
iv) 100μl의 농도를 알수없는 Dog serum을 A에 넣고, 200μl의 100배 희석된 Dog serum 을 B에 넣는다. C에 100μl의 PBS와 B용액의 100μl를 넣고 섞은다음 D에 100μl을 옮 긴후 D에 100μl의 PBS를 넣고 섞은다음......G까지 하다보면 각각의 Plate는 100μl의 농도가 다른 용액이 들어있게된다.
(A:농도모름 B:10ng/ml, C:5ng/ml, D:2.5ng/ml, E:1.25ng/ml, F:0.6ng/ml, G:0.3ng/ml ) 다 넣은후 1시간 기다리고 PBS-T로 3회 씻어준다.
v) 각 plate well에 50μl의 Detection Ab(Goat α-Dog IgM-HRP)를 넣어준후 1시간 배양
하고 PBS-T로 3회 씻어준다.
→HRP는 처음에는 파랑색이었다가 기질과 반응하면 노랑색으로 변한다. 색깔로 Ag의
존재 유무를 알아낼 수 있다.
vi)각 plate well에 50μl의 Substrate(TMB)를 넣어준후 15~20분 기다린다.
→HRP와 TMB가 반응하면서 노랑색을 띈다.
vii)각 plate well에 50μl의 stop solution을 넣어준다.
→효소의 활성을 억제하여 background와의 차이를 확실하게 하고, 시간이 지나고 흡광 도의 데이터값이 일정하게 해준다.
viii)ELISA reader로 OD값을 측정하고 비교하여 농도를 모르는 A에 있던 Ag의 농도를 그 래프를 통하여 알아낸다.
2.ELISA reader o…(생략)
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iii) 100μl의 Blocking Reagent(3%BSA/PBS)를 넣어줘서 Capture Ab외의 물질이 plate 바닥에 달라붙지 못하도록 코팅해준다. 면역학 실험 레포트 업로드 BO .G까지 하다보면 각각의 Plate는 100μl의 농도가 다른 용액이 들어있게된다. vi)각 plate well에 50μl의 Substrate(TMB)를 넣어준후 15~20분 기다린다..25ng/ml, F:0.6ng/ml, G:0. 면역학 실험 레포트 업로드 BO .면역학 실험 레포트 업로드 면역학 실험 레포트. →넣고,흔들고,털고를 3회반복. vi)각 plate well에 50μl의 Substrate(TMB)를 넣어준후 15~20분 기다린다. iv) 100μl의 농도를 알수없는 Dog serum을 A에 넣고, 200μl의 100배 희석된 Dog serum 을 B에 넣는다.hwp 자료 (File). 면역학 실험 레포트 업로드 BO .. -실험준비물: Capture Ab(Goat α-Dog IgM), Blocking Reagent(3%BSA/PBS), Detection Ab(Goat α-Dog IgM-HRP), PBS-T, TMB, stop solution, ELISA reader, pipette, tube, plate, 거즈, Dog serum..25ng/ml, F:0.. →sandwich ELISA를 위해 plate바닥에 Ab를 코팅하기위해서 ii) 넣었던 Capture Ab를 버리고 PBS-T(200μl)를 이용해 3회 씻어준다.zip 1. →넣고,흔들고,털고를 3회반복. →HRP와 TMB가 반응하면서 노랑색을 띈. 색깔로 Ag의 존재 유무를 알아낼 수 있다.3ng/ml ) 다 넣은후 1시간 기다리고 PBS-T로 3회 씻어준다. viii)ELISA reader로 OD값을 측정하고 비교하여 농도를 모르는 A에 있던 Ag의 농도를 그 래프를 통하여 알아낸다. →HRP와 TMB가 반응하면서 노랑색을 띈 실험내용 -실험목적: sandwich ELISA를 이용하여 개 혈청의 IgM을 정량,정성분석 한다.hwp. 면역학 실험 레포트 업로드 BO . v) 각 plate well에 50μl의 Detection Ab(Goat α-Dog IgM-HRP)를 넣어준후 1시간 배양 하고 PBS-T로 3회 씻어준다.. 면역학 실험 레포트 업로드 BO . →효소의 활성을 억제하여 background와의 차이를 확실하게 하고, 시간이 지나고 흡광 도의 데이터값이 일정하게 해준다.. washing이 더 잘되도록 해주는 개면활성제인 Tween20 을 넣어준 PBS-T는 불순물을 제거해준다. iii) 100μl의 Blocking Reagent(3%BSA/PBS)를 넣어줘서 Capture Ab외의 물질이 plate 바닥에 달라붙지 못하도록 코팅해준다. -실험준비물: Capture Ab(Goat α-Dog IgM), Blocking Reagent(3%BSA/PBS), Detection Ab(Goat α-Dog IgM-HRP), PBS-T, TMB, stop solution, ELISA reader, pipette, tube, plate, 거즈, Dog serum. (A:농도모름 B:10ng/ml, C:5ng/ml, D:2.. 색깔로 Ag의 존재 유무를 알아낼 수 있다. 면역학 실험 레포트 업로드 BO . 면역학 실험 레포트 업로드 BO .면역학 실험 레포트 업로드 BO .zip 1..면역학 실험 레포트 업로드 면역학 실험 레포트. (A:농도모름 B:10ng/ml, C:5ng/ml, D:2.hwp 면역학 실험 레포트. -실험과정(실제 했던 실험이 아닌 해야했던 실험과정) i) A~H까지있는 plate의 각각의 well에 Capture Ab(Goat α-Dog IgM)를 넣어준다. C에 100μl의 PBS와 B용액의 100μl를 넣고 섞은다음 D에 100μl을 옮 긴후 D에 100μl의 PBS를 넣고 섞은다음. iv) 100μl의 농도를 알수없는 Dog serum을 A에 넣고, 200μl의 100배 희석된 Dog serum 을 B에 넣는다.G까지 하다보면 각각의 Plate는 100μl의 농도가 다른 용액이 들어있게된다.ELISA reader o…(생략) 면역학 실험 레포트.3ng/ml ) 다 넣은후 1시간 기다리고 PBS-T로 3회 씻어준다. →HRP는 처음에는 파랑색이었다가 기질과 반응하면 노랑색으로 변한다. C에 100μl의 PBS와 B용액의 100μl를 넣고 섞은다음 D에 100μl을 옮 긴후 D에 100μl의 PBS를 넣고 섞은다음. →HRP는 처음에는 파랑색이었다가 기질과 반응하면 노랑색으로 변한다. viii)ELISA reader로 OD값을 측정하고 비교하여 농도를 모르는 A에 있던 Ag의 농도를 그 래프를 통하여 알아낸다. 면역학 실험 레포트 업로드 BO . 2. 그리고 1시간 기다린후 PBS-T로 3회씻어준다. →sandwich ELISA를 위해 plate바닥에 Ab를 코팅하기위해서 ii) 넣었던 Capture Ab를 버리고 PBS-T(200μl)를 이용해 3회 씻어준다.hwp 면역학 실험 레포트. 2.. vii)각 plate well에 50μl의 stop solution을 넣어준다. -실험과정(실제 했던 실험이 아닌 해야했던 실험과정) i) A~H까지있는 plate의 각각의 well에 Capture Ab(Goat α-Dog IgM)를 넣어준다. 면역학 실험 레포트 업로드 BO .hwp 자료 (File). vii)각 plate well에 50μl의 stop solution을 넣어준다. 면역학 실험 레포트 업로드 BO . 그리고 1시간 기다린후 PBS-T로 3회씻어준다. 면역학 실험 레포트 업로드 BO .ELISA reader o…(생략) 면역학 실험 레포트.hwp.. 실험내용 -실험목적: sandwich ELISA를 이용하여 개 혈청의 IgM을 정량,정성분석 한다. v) 각 plate well에 50μl의 Detection Ab(Goat α-Dog IgM-HRP)를 넣어준후 1시간 배양 하고 PBS-T로 3회 씻어준다.5ng/ml, E:1. washing이 더 잘되도록 해주는 개면활성제인 Tween20 을 넣어준 PBS-T는 불순물을 제거해준다.6ng/ml, G:0.5ng/ml, E:1. →효소의 활성을 억제하여 background와의 차이를 확실하게 하고, 시간이 지나고 흡광 도의 데이터값이 일정하게 해준다.