고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 사용한 과일 쥬스 속의 등록 MY

고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 사용한 과일 쥬스 속의 등록
 

1. 이론
크로마토그래피란 혼합된 시료성분이 분리관(column)의 고정상과 이동상을 통하여 흐르면서 시료가 고정상과 이동상에 흡착작용,분배작용, 이온교환작용,분자크기 배제작용 등의 물리,화학적 작용의 차이를 일으켜 각각의 단일 성분으로 분리되는 현상으로 혼합물중의 각 성분을 분리, 정성, 정량 등 분석목적에 혹은 분리,정제등 분취 목적에 이용된다. 이중 액체 크로마토그래피는 이동상으로 액체를 사용한 chromatography의 총칭으로 본실험에 사용되는 고성능 액체 크로마토그래피는 이동상으로 액체를 쓰고, 고정상으로 고체를 쓰는 액-고 크로마토그래피이다.
본 실험은 비타민 C를 검출하는 것으로, 몇가지 쥬스 시료를 UV검출기를 사용하여 강염기 음이온 교환컬럼상에서 분석하는 것이다. 비타민 C표준물질로는 1-아스코르브산을 사용한다. 이 표준물질의 peak위치, 면적과 실험 시료를 비교하여 비타민 C를 정성, 정량적으로 분석하는 것이다.

Liquid Chromatography 이 원리.
LC는 그 특성상 용매에 녹일 수 있는 물질이라면 어느 것이든 분리가 가능한데, 휘발성이나 열에 대한 안정성에 관계없이 무기화합물이건 유기화합물이건, 저분자이든 고분자 물질이든간에 어떤 것이나 모두 가능하다. 이는 LC가 상황에 따라 유연하게 여러 가지 정지상과 이동상을 고를 수 있기에 가능한 것이다.
LC는 관 chromatography의 일종인데 관에 정지상을 채워넣고 액체 이동상으로 분리를 하는 것이다. 관 크로마토 그래피에서는 시료 속의 각성분이 이동상에 녹은 항태로 충정관을 통하고 용출액으로서 관출구로부터 차례로 용출되므로 이를 직접 모니터하여 용출성분을 검출하거나 용출액의 일정량을 채취하여 흡광도법과 같은 것을 이용하여 측정하기도 한다.
쓰이는 관의 길이는 보통 관의 안지름의 10～50배정도가 적닫하다.
 

    
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